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bradford法蛋白定量检测试剂盒

货号

名称

规格

目录价

M1001

bradford法蛋白定量检测试剂盒

500T

160.00


产品简介:

本公司生产的bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前广泛应用的蛋白浓度检测方法之一bradford法研制而成。其操作简单,灵敏度高,检测速度极快。可检测浓度下限达25μg/ml的蛋白样品,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。本产品主要成分为考马斯亮蓝G250。


组份:

产品货号

产品名称

规格

M1001-1

考马斯亮蓝G250溶液

250ml

M1001-2

蛋白标准(BSA)(4℃)

25mg

M1001-3

蛋白标准配制液

1.5ml


保存条件:

考马斯亮蓝G250溶液室温保存,配置好的蛋白标准液-20℃冻存。有效期半年。


操作说明:

1.取1ml蛋白标准配置液加入到25mgBSA的蛋白标准管中,完全溶解蛋白标准品,即为25mg/ml的蛋白标准溶液。配制成的蛋白标准溶液可-20℃长期保存。

2.取适量25mg/ml蛋白标准溶液,稀释至终浓度为0.5mg/ml。标准品最好与蛋白样品用同样的溶液稀释。但为了简便起见,通常使用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

3.做标准曲线。将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板中,不足20μl的加标准品稀释液补足到20μl。

4.将待测的蛋白样品稀释至合适浓度,加到96孔板中,使待测样品总体积也为20μl。

5.每孔加入考马斯亮蓝G250溶液200μl,充分混匀(可将酶标板放在振荡器上振荡30s),室温放置3-5min后,以标准曲线0号做参比,在 595nm波长下比色测定,记录各孔吸光度值。以标准品蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。根据所测样品的吸光值,在标准曲线上即可查得相应的蛋白含量(μg),除以样品稀释液总体积(20μl),乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度。

6.如用分光光度计测定,请在第三步的时候将标准品体积改为1ml,浓度梯度用生理盐水稀释为0,1,2,5,10,15,30μg/ml。或根据样品调整浓度梯度。

7.将样品稀释至合适浓度,加到小试管中,使待测样品总体积也为1ml。

8.每只试管加考马斯亮蓝G250溶液3ml,充分混匀,室温放置3-5min后,以标准曲线0号做参比,在 595nm波长下比色测定,记录各孔吸光度值。


注意事项:

1.考马斯亮蓝G250溶液使用前请颠倒3-5次,混匀。

2.蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

3.将考马斯亮蓝G250溶液回复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。

4.Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%,Triton X-100低于 0.05%,Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢剂的样品推荐使用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒。


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