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RIPA裂解液(强)
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货号

名称

规格

目录价

M1006

RIPA裂解液(强)

30ml

88

M1007

RIPA裂解液(强)

100ml

198


产品简介:

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA裂解液有很多配方,按效果来分主要分为强,中,弱三种。本裂解液为RIPA强裂解液,其主要成分为50mM Tris-Hcl,150mM NaCl,1 mM  EDTA-Na2, 1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS。


保存条件:

4℃避光保存,一年有效


操作说明:

对于组织样品:

1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)冰上彻底匀浆。

3.将匀浆液转移至1.5ml离心管中,振荡。冰浴30min,期间用移液器反复吹打,确保细胞完全裂解。

4.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白溶液。


对于培养细胞样品:

1.对于贴壁细胞:

a.用PBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。

b.加入适当体积的细胞总蛋白提取试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5分钟。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。

c.用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5ml离心管中。

2.对于悬浮细胞:

离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 ul细胞总蛋白提取试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。

3.冰浴30min,期间每10分钟用200ul移液器反复吹打数次,确保细胞完全裂解。

4.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白。


注意事项:

对于组织样品:

每50mg组织约加入1ml的本试剂裂解。对于软骨、皮肤等组织,可适当减少试剂用量,以提高蛋白浓度。

对于培养细胞样品:

1.正常细胞密度下,每个6孔板细胞加入250ul左右裂解液。其它类推。

2.裂解时可能会出现较粘稠状。可用移液器反复吹打,直至呈液状为止。如果一直较稠,可再加入适量裂解液。

3.此试剂对人体有害,请适当防护。



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